期刊简介
《中华肾病研究电子杂志》（DVD-ROM）是由国家新闻出版总署批准创办（新出审字［2011］814 号），国内统一连续出版物号（CN）11-9325/R，国际标准连续出版物号（ISSN）2095-3216。本刊由国家卫生和计划生育委员会主管、中华医学会主办、中国人民解放军总医院承办、中华医学电子音像出版社出版的专业性电子学术期刊，是“中华医学会系列杂志”之一。本刊为中英文双月刊，逢双月下旬出版。已被“中国科技核心期刊”（中国科技论文统计源期刊）、《中文科技期刊数据库》、《中国学术期刊网络出版总库》收录。本刊以从事肾脏疾病相关专业医务和科研工作者为主要读者对象，采用图文声像多种形式，反映肾脏病学领域基础研究与临床应用信息与成果，宣传介绍肾脏病防治措施，促进学术交流，推动我国肾脏病学研究与临床工作发展。光盘内包括所有文章的电子版内容，以及专题演讲视频、专家讲座视频、热点问题讨论会视频、临床病例讨论会视频、查房视频、手术操作视频等。本刊的办刊宗旨是：贯彻党和国家的卫生工作方针政策，贯彻理论与实践、普及与提高相结合的办刊方针，鼓励临床与科研创新，倡导学术民主与学术争鸣，反映我国肾脏病临床和科研工作的重大进展，促进国内外肾脏病领域的学术交流。
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- 杂志名称：中华肾病研究电子杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：28
- 国内刊号：2095-3216
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：万方收录(中), 维普收录(中), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏
XBP1s 条件性过表达定点敲入小鼠模型的建立
杨鸿泽；刘永鑫；肖炎光；许国双
关键词：XBP1s, 非折叠蛋白反应/内质网应激, 同源重组, 基因打靶, 条件性基因敲入
摘要：目的：获得可进行条件性过表达 XBP1s 基因的 Rosa 26定点敲入杂合子小鼠。方法通过 In-Fusion Cloning 的方法构建胚胎干细胞（ES 细胞）打靶载体，并进行线性化，电转染 JM8A3 ES细胞。药物筛选获得抗性 ES 细胞克隆，经长片段 PCR 鉴定获得正确同源重组的阳性克隆。阳性 ES细胞经克隆扩增后，注射入 C57BL／6J 小鼠的囊胚中，获得嵌合鼠，筛选出高比例嵌合小鼠与野生型C57BL／6J 小鼠交配后获得阳性 F1代小鼠，并分别进行 PCR 和测序鉴定。结果经酶切鉴定证明打靶质粒构建成功，经胚胎干细胞打靶共获得144个抗性 ES 细胞克隆，通过长片段 PCR 的方式对同源重组阳性克隆进行筛选和克隆经测序确认，共获得21个正确同源重组的阳性克隆。阳性 ES 细胞克隆 E3、C6经扩增后注射 C57BL／6J 小鼠囊胚96个，通过胚胎移植，共获得2只高嵌合雄鼠，与野生型C57BL／6J 小鼠交配后获得3只 F1代杂合小鼠，经 PCR 及测序鉴定正确。结论成功建立了 XBP1s基因的 Rosa26定点敲入 F1代杂合子小鼠，为未来获得免疫细胞、肾脏固有细胞及腹膜间皮细胞XBP1s 条件性敲入小鼠奠定了基础。
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