期刊简介
《中华肾病研究电子杂志》（DVD-ROM）是由国家新闻出版总署批准创办（新出审字［2011］814 号），国内统一连续出版物号（CN）11-9325/R，国际标准连续出版物号（ISSN）2095-3216。本刊由国家卫生和计划生育委员会主管、中华医学会主办、中国人民解放军总医院承办、中华医学电子音像出版社出版的专业性电子学术期刊，是“中华医学会系列杂志”之一。本刊为中英文双月刊，逢双月下旬出版。已被“中国科技核心期刊”（中国科技论文统计源期刊）、《中文科技期刊数据库》、《中国学术期刊网络出版总库》收录。本刊以从事肾脏疾病相关专业医务和科研工作者为主要读者对象，采用图文声像多种形式，反映肾脏病学领域基础研究与临床应用信息与成果，宣传介绍肾脏病防治措施，促进学术交流，推动我国肾脏病学研究与临床工作发展。光盘内包括所有文章的电子版内容，以及专题演讲视频、专家讲座视频、热点问题讨论会视频、临床病例讨论会视频、查房视频、手术操作视频等。本刊的办刊宗旨是：贯彻党和国家的卫生工作方针政策，贯彻理论与实践、普及与提高相结合的办刊方针，鼓励临床与科研创新，倡导学术民主与学术争鸣，反映我国肾脏病临床和科研工作的重大进展，促进国内外肾脏病领域的学术交流。
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- 杂志名称：中华肾病研究电子杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：28
- 国内刊号：2095-3216
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：万方收录(中), 维普收录(中), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏
HO-1基因修饰对急性肾损伤微环境下骨髓间充质干细胞增生分化的影响
刘楠梅；王会玲；韩国锋；于秀峙；田军；胡伟锋；张金元
关键词：血红素加氧酶-1, 骨髓间充质干细胞, 急性肾损伤
摘要：目的：观察经血红素加氧酶-1（HO-1）基因修饰的骨髓间充质干细胞（BMSCs）在急性肾损伤（AKI）微环境下的增生分化，并探讨其机制。方法Gateway 技术构建含 HO-1目的基因的质粒，同时构建仅含示踪基因 eGFP 的对照载体；脂质体法转染293FT 细胞获得慢病毒原液 lenti-HO-1-eGFP 和 lenti-eGFP；稀释后分别感染 BMSCs 获得 HO-1-BMSCs 和 eGFP-BMSCs（空载体对照），检测转染细胞的活力、分化潜能。制作缺血再灌注诱导 AKI 大鼠的肾脏匀浆上清（AKI-KHS），以正常大鼠肾脏匀浆上清（N-KHS）作为对照，分别干预 BMSCs、eGFP-BMSCs 和 HO-1-BMSCs，构成空白组（BMSCs 组）、对照组（BMSCs／N-KHS 组）、BMSCs／AKI-KHS 组、eGFP-BMSCs／AKI-KHS 组和 HO-1-BMSCs／AKI-KHS 组，于37℃、5％ CO2培养箱中培养3 d。MTT 法检测培养 BMSCs 的生长抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡，透射电镜观察细胞超微结构变化，免疫组化法检测细胞内角蛋白18（CK18）表达，Western 印迹对各组细胞内 HO-1、磷酸化丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶（pAKT）、磷酸化细胞外信号调节激酶（pERK）水平进行检测。用 SPSS19．0统计软件进行统计学分析。结果基因修饰并未改变BMSCs 活力及多向分化潜能。与对照组比，BMSCs／AKI-KHS 组的细胞生长抑制率和凋亡阳性细胞比例显著增加（t ＝12．581，t ＝16．283；P ＜0．05）；经 HO-1基因修饰后，HO-1-BMSCs／AKI-KHS 组的细胞生长抑制率和凋亡阳性细胞比例均有显著下降（t ＝5．958，t ＝7．957；P ＜0．05）。AKI-KHS 可诱导BMSCs 出现肾小管上皮细胞样分化的超微结构改变，胞浆中可观察到 CK18表达，以 HO-1-BMSCs／AKI-KHS 组的 CK18＋细胞比例高（t ＝4．057，P ＜0．05）。与 BMSCs／AKI-KHS 组相比，HO-1-BMSCs／AKI-KHS 组的细胞内 HO-1蛋白水平显著增高（t ＝4．163，P ＜0．05），并伴随着细胞内 pAKT、pERK 蛋白水平显著增高（tpAKT ＝14．305，tpERK ＝7．148；P ＜0．05）。结论 HO-1基因修饰可改善 AKI微环境下培养 BMSCs 的增殖，细胞凋亡减轻，向肾小管上皮样细胞转分化能力增加，HO-1的过表达及其下游的 AKT、ERK 为发挥作用的可能信号通路。
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